Diagnostic Biologique et Moléculaire de la Beta-thalassémie chez une Partie d'Enfants d'Algérie. Doctorat thesis (2018) , Université de Batna 2.
No Thumbnail Available
Date
2018-05-30
Authors
BELHADI Kamilia
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Abstract
Le présent travail a pour but d’effectuer un diagnostic biologique et moléculaire chez une partie d’enfants algériens dans la wilaya de Batna ( L’est Algérien), est d'étudier les aspects biologiques ainsi que de caractériser des mutations du gène HBB portées par les sujets malades pour les placer dans le spectre de répartition dans la population Algérienne. En outre notre travail nous permettra d’étudier les effets des mutations du gène HBB sur les variations des paramètres biologiques chez nos patients. Concernant le diagnostic biologique, les échantillons de sang ont été prélevés sur 10 enfants beta-thalassémiques homozygotes suivis au niveau du CHU de Batna. Les prélèvements de sang ont été effectués juste avant la transfusion et également à partir de 10 enfants sains. Les patients et les témoins étaient de même âge et de même sexe. Tous les cas ont bénéficié des tests hématologiques tels que l’hémogramme (numération des hématies, calcules des indices érythrocytaire, VGM et TCMH, mesure du taux de l’hémoglobine), examen des hématies sur frottis et enfin un test biochimique en l’occurrence d’électrophorèse CAPILLARYS HEMOGLOBINE et le dosage de la ferritine. Les résultats obtenus ont montré que 70% des cas de beta thalassémique majeure sont issus des mariages consanguins, les parents sont cousins du 1er degré et 2eme degré. Des cas anémiques graves ont été observés chez les patients où une diminution de l'hémoglobine par rapport aux témoins 12,4 ± 0,3055 vs 5,8 ± 0,6464 g / dl, respectivement. Une microcytose avec hypochromie est significativement perceptible chez les patients que chez les témoins avec des valeurs VGM et TCMH de 74,3 ± 5,224 fl et 29,2 ± 0,5333 pg chez les patients par rapport à 59,3 ± 0,7311 fl et 15,1 ± 0,6574 pg. En outre, une thrombocytose sensiblement secondaire et une leucocytose ont été signalés chez ces patients. Les complications d'endocrinopathies sont associées à la beta-thalassémie majeure de nos sujets sont l'hypogonadisme et l'ostéoporose 26.31%, déficit en GH 21.05%, Ainsi, Les caractéristiques biochimiques ont montré qu'il y a une surcharge en fer chez les patients par rapport aux témoins avec la ferritine sérique 1278 ± 87,74ng / l vs 175,2 ± 7,728ng / l. Cependant le diagnostic moléculaire a été réalisé sur 19 enfants beta-thalassémiques. Nous avons choisi la méthode de miniséquençage à l’aide du kit SNaPshotTM (Applied Biosystem) puisqu’elle permet la recherche rapide des 4 mutations (Codon39, IVS-I-110, IVS-I-1, G6V) les plus communes et fréquentes du gène HBB et le séquençage direct par la méthode de Sanger pour détecter les mutations rares. Les résultats obtenus montrent la présence des mutations différentes responsables de β- thalassémie avec une prédominance de la mutation non-sens du codon 39 (C > T) qui représente 84,21% des allèles étudiés. Trois autres mutations ont été décrite dans notre population : IVS-I-110 (G>A) qui représente une fréquence minoritaire (7,89%), cette mutation est associée avec la mutation non sens codon 39 (C>T). Deux rares mutations ont été observées avec des fréquences différentes, il s'agit du codon 54(-T) (5,26%), cette lésion est détectée chez une deuxième famille algérienne et la mutation du codon 27 (G > T) ou Hb Knossos (2,63%) qui représente une première association avec la mutation non sens du codon 39 (C > T) dans la population algérienne. Tandis que les mutations détectées du gène HBB ont des différents effets sur les variations des paramètres biologiques ainsi que sur l’aspect cytologique des hématies.