Thèse de Doctorat
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Browsing Thèse de Doctorat by Author "BOUAFIA Waffa"
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- ItemEvaluation des activités biologiques et caractérisation phytochimique de la plante Ephedra altissima Desf. Doctorat thesis(2021), Université de Batna 2.(2021-09-26) BOUAFIA WaffaEphedra altissima Desf. est une plante médicinale de la famille des Ephedraceae, largement utilisée en médecine traditionnelle pour le traitement des maladies respiratoires et le diabète. L’objectif de la présente étude est l’évaluation des activités biologiques in vitro et la caractérisation phytochimique des extraits (éther de pétrole, acétate d’éthyle et n-butanol) obtenus à partir de la plante Ephedra altissima. Des dosages colorimétriques ont été effectués pour révéler la présence de différentes classes de métabolites secondaires. La détermination des teneurs en polyphénols, flavonoïdes et tanins condensés a été réalisée par des dosages spectrophotométriques. L’activité antioxydante a été évaluée par huit méthodes différentes, l’activité anti-artéritiques a été réalisée par la méthode d’inhibition de la dénaturation du sérum d’albumine bovin, les activités inhibitrices de l’α-amylase et de la lipase pancréatique in vitro ont été estimées par des méthodes colorimétriques en utilisant de l'amidon et du p-nitrophényl butyrate en tant que substrats. Les conditions physiologiques de la digestion humaine ont été simulées par le modèle de la digestion gastro-intestinale (DGI) in vitro. L’activité antibactérienne a été déterminée par la méthode de diffusion sur disques en milieu gélosé contre sept souches bacteriennes. L’analyse et la quantification des composés phénoliques ont été effectuées par LC-DAD-ESI/MS. L’investigation phytochimique de l’extrait n-butanolique a été réalisée par l’utilisation en alternance de diverses méthodes chromatographiques (VLC, CC, CCE et CCM). Les structures des deux composés isolés A et B ont été identifiées par analyse spectroscopique ESI-MS, l’UV et la RMN dans ses multiples techniques, RMN 1H, RMN 13C, et RMN 2D (COSY, HSQC, HMBC et TOCSY). A l’issue de ces travaux, nous retiendrons la richesse de cette plante en métabolites secondaires. En effet, l’extrait AcOEt présente la teneur la plus élevée en polyphénols (125,62 μg EAG mg-1), et le n-BuOH possède la teneur la plus élevée en flavonoïdes (19,18 μg EQ mg-1). Tous les extraits ont des activités antioxydantes dans divers systèmes et l'extrait aqueux a montré une bonne activité antioxydante par la méthode potentiométrique. L’extrait AcOEt exhibe la plus forte activité anti-artéritique, activités inhibitrices de de l’α-amylase et de la lipase pancréatique avec des valeurs de CI50 (126,4 ± 2,36, 8,07 ± 0,15 et 289,1 ± 0,53 μg/ml) respectivement. Tous les extraits testés exercent une activité antibactérienne dose dépendante contre au moins trois souches avec des CMI allant de (3,12 à 50 μg/ml). L’analyse par LC-DAD-ESI/MS a permis de détecter la présence de dix-neuf composés différents, huit sont des acides phénoliques simples et des dérivés d'acide phénolique, et onze sont des flavonoïdes liés à des groupes glycosyles. L’investigation phytochimique réalisée sur l’extrait n-batanolique conduit à l’isolement et identification structurale de deux flavonoides glycosylés nommés : Isorhamnétine 3-O- α-L-rhamnopyranosyl (1’’’-6’’)- β-D-galactopyranoside et Kaempférol 3-O- α-L-rhamnopyranosyl (1’’’-6’’)- β-D-glucopyranoside.